Sintesis Tetrapeptida (Phe-Asn(Trt)-Ala-Pro) Sebagai Kandidat Antioksidan dengan Metode Solid Phase Peptide Synthesis (SPPS)
Abstract
ABSTRACT: Antioxidant peptides are a group of peptides that have antioxidant activity that plays a role in counteracting free radicals by complementing the deficiency of free radicals thereby inhibiting chain reactions.One of the natural antioxidant peptides that researchers found was tetrapeptide (Phe-Leu-Ala-Pro) which was isolated from the sea cucumber (Acaudina molpadioides) located in the china and was found to have antioxidants activity. The search on the analogues of the antioxidant tetrapeptide was continued. From this study, a tetrapeptide analogue FNAP (Phe-Asn(Trt)-Ala-Pro) has been successfully synthesised by solid phase peptide synthesis (SPPS) method with Fmoc-amino acid strategy using 2-chlorotrityl chloride resin as a buffer and coupled with a coupling reagent, HOBt and DIPEA. The sample weight resulted was 173,4 mg which was then characterized using a mass spectrophotometer and it was obtained the peak of the fragment at m/z 448,2193. RP[1]HPLC was used to obtain the purity of the tetrapeptide mixture which resulted peak retention time at 5,738 and 5,725 minutes. On the antioxidant assay using DPPH method, the results obtained from the tetrapeptide compound showed an IC50 value of 2.819 ppm which indicated the antioxidant activity of the tetrapeptide compound was weak, which indicates that FNAP exhibits lower antioxidant activity than FLAP in previous studies Keywords : Solid phase peptide synthesis (SPPS), tertapeptide, antioxidant
ABSTRAK: Peptida antioksidan merupakan kelompok peptida yang memiliki aktivitas antioksidan yang berperan untuk menangkal radikal bebas dengan cara melengkapi kekurangan elektron dari radikal bebas sehingga menghambat terjadinya reaksi berantai. Salah satu peptida antioksidan alami yang telah ditemukan pada peneliti sebelumnya adalah tetrapeptida (Phe-Leu-Ala-Pro) yang diisolasi dari teripang (Acaudina molpadioides) yang berada di cina dan telah dilaporkan memiliki aktivitas antioksidan. Pencarian analog tetrapeptida antioksidan yang lebih baik hingga saat ini masih terus dilakukan. Pada penelitian ini telah berhasil disintesis analog tetrapeptida lainnya FNAP (Phe-Asn(Trt)-Ala-Pro) dan telah berhasil disintesis dengan menggunakan metode sintesis peptida fase padat (SPPS) menggunakan stategi Fmoc-asam amino, penyangga yaitu resin 2- klorotritil klorida dan dikopling dengan reagen pengkopling diantaranya HBTU, HOBt dan DIPEA. Hasilnya didapat bobot sampel sebesar 173,4 mg yang kemudian dilakukan proses karakterisasi dengan menggunakan spektrofotometer massa didapat puncak fragmennya pada m/z 448,2193 dan untuk memastikan kemurnian dari senyawa tetrapeptida tersebut dilakukan proses RP-HPLC yaitu hasil yang didapat pada menit ke 5,738 dan 5,725 menunjukkan puncak waktu retensinya. Pada pengujian aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode DPPH, nilai IC50 yang di dapat sebesar 2.819 ppm yang menunjukan bahwa aktivitas antioksidan dari senyawa tetrapeptida tersebut lemah, yang mengindikasikan bahwa FNAP menunjukkan aktivitas antioksidan yang lebih rendah daripada FLAP pada peneliti sebelumnya.
Kata kunci : Sintesis peptida fase padat, tetrapeptida, antioksidan
Keywords
Full Text:
PDFReferences
Chan WC, White PD. (2000). Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis: Sebuah Pendekatan Praktis. Oxford, Inggris.
Droge, W. (2002). Free Radicals in The Physiological Control of Cell Function. Physiol Rev. 82, 47-95.
Huo-Xi J, Hong-Ping X, Yan Li, Qian-Wei Z and Hui Xie. (2019). Preparation and Evaluation of Peptides with Potential Antioxidant Activity by Microwave Assisted Enzymatic Hydrolysis of Collagen from Sea Cucumber Acaudina Molpadioides Obtained from Zhejiang Province in China. Marine Drug, China.
Kim, S.J., McAlpine, S.R. (2013). Solid Phase versus Solution Phase Synthesis of Heterocyclic Macrocycles. J. Molecules, Vol. 8: 1111-1121.
Maharani, R., Yanti, E. F. (2016). Sintesis Heptapeptida Linear (H-Tyr-Asp-Pro-Ala-Pro-Pro-Pro-Oh) Dengan Menggunakan Dic/Oksima Sebagai Reagen Pengkopling. (2016). Departemen Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Padjadjaran, Bandung 4(1).
Merrifield, R.B. (1963). Solid phase peptide synthesis. I. The synthesis of a tetrapeptide. Journal of the American Chemical Society. 85(14): 2149-2154.
Murray, R. K., Granner, D. K., Rodwell, V. W. (2009). Biokimia harper (27 ed.). Jakarta: Buku Kedokteran EGC.
Molyneux, P. (2004). The Use Of The Stable Free Radical Diphenylpi. ryl-hydrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity, Songklanakarin J. Sci. Technol. , 212-217.
Rohdiana, D. (2001). Aktivitas Daya Tangkap Radikal Polifenol dalam Daun Teh. Majalah Jurnal Indonesia. 12, 53-58.
Rohman, A.; Riyanto S.; Yuniarti N.; Saputra W.R.; Utami R.; Mulatsih W. (2010). Antioxidant Activity, Total Phenolic and Total Flavaonoid of Extracts and Fractions of Red Fruit (Padanus conoideus Lam). International Food Research Journal. 17, 97- 106.
Sanchez A, Vasquez A. (2017). Bioactive peptides: A review. Food Qual Saf. 1: 29-46.
Subandiyono, S., Hastuti. (2016). Buku Ajar Nutrisi Ikan. Semarang: Lembaga Pengembangan dan Penjaminan Mutu Pendidikan Universitas Diponegoro.
Subiros, R., Prohens, R., Barbas, R., Faham, A. E., Albericio, F. (2009). Oxyma: An Efficient Additive for Peptide Synthesis to Replace the Benzotriazole-Based HOBt and HOAt with a Lower Risk of Explosion. Chemistry European A Journal. Spain : Barcelona Science Park Baldiri Reixac 10.
Sunarni, T., Pramono, S., Asmah, R. (2007). Flavonoid antioksidan penangkap radikal dari daun kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.). Hook f. & Th., M.F.I., 18 (3) : 111- 116.
Windono, T., Soediman, S., Yudawati, U., Ermawati, E., Srielita, Erowati, T. I. (2001). Uji Peredam Radikal Bebas terhadap 1,1- Diphenyl-2-Picrylhydrazyl (DPPH) dari Ekstrak Kulit Buah dan Biji Anggur (Vitis vinifera L.) Probolinggo Biru dan Bali. Artocarpus. 1, 34-4.
Zou W, Xiao Z, Wen X, Luo J, Chen S, Cheng Z, e al. (2016). The Antiinflammatory Effect of Andrographis Paniculata (Burm. F.) Nees on Pelvic inflammatory Disease in Rats ThroughtDown-Regulation of The NF-Kb Pathway. BMC Complement Altern Med.
Fauzi, Nur Muhammad. (2021). Uji Kualitatif dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanolik Buah Maja (Aegle Marmelos (L.)Correa) dengan Metode DPPH. Jurnal Riset Farmasi, 1(1), 1-8.
DOI: http://dx.doi.org/10.29313/.v0i0.29413
