Sintesis Tetrapeptida YLYA (Tyr-Leu-Tyr-Ala) sebagai Kandidat Antioksidan dengan Metode Solid Phase Peptide Synthesis

Abstract

Abstract. Free radicals are unstable compounds or molecules inside cells and it has one or more electrons in their outer orbitals unpaired, that causes electrons to be reactive. The risk of the impact of free radical reactivity can be reduced by the use of antioxidant compounds. In this study YLYA (Tyr-Leu-Tyr-Ala) tetrapeptides which have antioxidant activity have been successfully synthesized using the Solid Phase Peptide Synthesis (SPPS) method. In this method using 2-chlorotrityl chloride resin as a solid phase buffer. In this synthesis process, the Fmoc/tBu strategy was chosen as a protective amino acid’s group. In the preparation of  YLYA tetrapeptides using 2-(1H-benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate  (HBTU) coupling reagents and Hydroxybenzodiazole (HOBT). After tetrapeptide’s formed which attach to the resin, the resin and the protective side group are released use trifluoroacetic acid (TFA) solution in dichloromethane (DCM). YLYA tetrapeptide compounds have been formed which are marked by the results of characterization using a mass spectrophotometer with an m/z value of 529.5621 at the peak of the [M+H]⁺ ion. In the RP-HPLC analysis results showed that the YLYA tetrapeptide compound was not pure because there were still minor peaks, the target compound was at the retention time of the 9^th minute. YLYA tetrapeptide compound have antioxidant activity with an IC 50 value of 4319,522 ppm in the DPPH test

Keywords: YLYA tetrapeptide, Solid Phase Peptide Synthesis (SPPS) method, Antioxidant, DPPH

 

Abstrak. Radikal bebas merupakan suatu senyawa atau molekul yang tidak stabil di dalam sel dan mempunyai satu atau lebih elektron yang pada orbital luarnya tidak berpasangan, sehingga dapat menyebabkan elektron bersifat reaktif. Resiko dampak reaktifitas radikal bebas tersebut dapat dikurangi dengan penggunaan senyawa antioksidan. Pada penelitian ini tetrapeptida YLYA (Tyr-Leu-Tyr-Ala) yang memiliki aktivitas antioksidan telah berhasil disintesis menggunakan metode Solid Phase Peptide Synthesis (SPPS). Pada metode ini menggunakan resin 2-klorotritil klorida sebagai penyangga fase padat. Pada proses sintesis ini dipilih strategi Fmoc/tBu sebagai gugus pelindung asam amino. Pada penyusunan tetrapeptida YLYA ini menggunakan reagen kopling 2-(1H-benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate (HBTU) dan Hydroxybenzodiazole (HOBT). Setelah terbentuk tetrapeptida yang menempel pada resin, kemudian dilakukan pelepasan resin dan pelindung gugus samping menggunakan larutan asam trifluoroasetat (TFA) dalam diklorometana (DCM). Senyawa tetrapeptida YLYA telah terbentuk yang ditandai dengan hasil karakterisasi menggunakan spektrofotometer masa dengan nilai m/z 529,5621 pada puncak ion [M+H]⁺. Pada hasil analisis RP-HPLC menunjukan bahwa senyawa tetrapeptida YLYA belum murni karena masih adanya puncak-puncak minor, senyawa target berada pada waktu retensi menit ke 9. Senyawa tetrapeptida YLYA memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC₅₀ sebesar 4319,522 ppm pada uji DPPH.

Kata Kunci: Tetrapeptida YLYA, Metode solid phase peptide synthesis (SPPS), Antioksidan, DPPH